目的 探討人表皮細胞與聚碳酸脂膜構建組織工程表皮模型的方法,建立可用于皮膚刺激試驗的組織工程表皮模型。 方法 應用組織工程方法,以聚碳酸脂膜為支架,以人皮膚角質形成細胞為細胞來源,構建組織工程表皮模型。氣液面培養(yǎng)13 d,通過HE 染色、角蛋白10(keratin 10,K10)和K13 抗體、K14 抗體、層粘連蛋白抗體、角化細胞交聯(lián)外膜蛋白抗體、中間絲相關蛋白抗體免疫熒光染色、透射電鏡觀察組織工程表皮模型組織結構。采用快速滲透試驗方法,SDS 分別作用于培養(yǎng)基中添加脂質物(實驗組)和未添加脂質物(對照組)的組織工程表皮模型18 h,測定組織活性減小50% 所需化學物質的濃度(half maximal inhibitory concentration of a substance,IC50)值。 結果 HE 染色、免疫熒光染色及透射電鏡觀察顯示,構建的組織工程表皮模型分化良好,具有與正常表皮相似的結構:基底膜、棘層、顆粒層和角化層。實驗組和對照組組織工程表皮模型的IC50 值分別為0.183%(6.00 mmol/L)和0.072%(2.36 mmol/L)。 結 論 在聚碳酸酯膜上構建的組織工程表皮模型具有與正常表皮相似的組織結構,并且具有一定的屏障功能。
引用本文: 李中良,伍津津,楊桂紅,奚廷斐,王春仁,陳亮. 用于替代皮膚刺激試驗的組織工程表皮模型的構建研究. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(2): 129-132. doi: 復制
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