• 昆明醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院 云南省腫瘤醫(yī)院(昆明,650118)1 胸外科 云南省腫瘤研究所肺癌研究中心,3 云南省腫瘤研究所分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,4 檢驗(yàn)科細(xì)菌室;;
  • 2 昆明醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院胸心血管外科;

目的 表皮葡萄球菌胞間黏附素基因(intercellar adhesion,ica)是細(xì)菌聚集的關(guān)鍵因子,通過(guò)分析醫(yī)源性表皮葡萄球菌生物膜基因型,探討ica 操縱子在聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)材料表面細(xì)菌生物膜形成中的作用。 方法 取56 株醫(yī)源性表皮葡萄球菌臨床分離株,應(yīng)用PCR 法、基因測(cè)序技術(shù)檢測(cè)細(xì)菌生物膜形成相關(guān)基因,包括16S rRNA、自溶素(autolysin,atlE)、纖維蛋白原結(jié)合蛋白(fibrinogen binding protein,fbe)以及ica。取醫(yī)源性表皮葡萄球菌制備濃度為1 × 105 cfu/mL 的細(xì)菌懸液,并根據(jù)目的基因檢測(cè)結(jié)果,分別以icaADB、atlE、fbe 陽(yáng)性基因型(ica 操縱子陽(yáng)性組)以及icaADB 陰性而atlE、fbe 陽(yáng)性基因型(ica 操縱子陰性組)與PVC 材料培養(yǎng)。于6、12、18、24、30 h 各取2 個(gè)PVC 材料,進(jìn)行激光共聚焦顯微鏡及掃描電鏡觀察,測(cè)量單位視野細(xì)菌群落數(shù)量及形成的細(xì)菌生物膜厚度。 結(jié) 果 目 的 基因檢測(cè)示,醫(yī)源性表皮葡萄球菌16S rRNA 陽(yáng)性率為100%(56/56);icaADB、atlE、fbe 陽(yáng)性基因型菌株占57.1%(32/56);icaADB 陰性而atlE、fbe 陽(yáng)性基因型菌株占37.5%(21/56)。測(cè)序結(jié)果示,目的基因16S rRNA、atlE、fbe、icaADB 擴(kuò)增產(chǎn)物序列分別與GenBank 中基因序列相符。隨時(shí)間延長(zhǎng),ica 操縱子陰性組的PVC 材料表面無(wú)明顯細(xì)菌生物膜形成;ica 操縱子陽(yáng)性組的PVC 材料表面細(xì)菌群落數(shù)量逐漸增多,細(xì)菌生物膜體積逐漸增大,24 h 時(shí)可見成熟的細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu),30 h 時(shí)細(xì)菌生物膜體積趨于穩(wěn)定。培養(yǎng)各時(shí)間點(diǎn)ica 操縱子陽(yáng)性組PVC 材料表面單位視野細(xì)菌群落數(shù)量(F=435.987,P=0.000)及細(xì)菌生物膜厚度(F=6 714.395,P=0.000)明顯高于ica 操縱子陰性組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 醫(yī)源性表皮葡萄球菌可以分為ica 操縱子陰性和ica 操縱子陽(yáng)性兩類細(xì)菌;ica 操縱子可以增加PVC 材料表面細(xì)菌生物膜的形成能力、細(xì)菌群落數(shù)量及細(xì)菌生物膜厚度,在PVC 材料表面細(xì)菌生物膜形成中具有重要作用。

引用本文: 葉聯(lián)華,黃云超,許賡,楊達(dá)寬,劉馨,周友全,郭鳳麗. 醫(yī)源性表皮葡萄球菌胞間黏附素基因操縱子在聚氯乙烯材料表面細(xì)菌生物膜形成中的作用研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(4): 466-471. doi: 復(fù)制

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