目的 探討上皮細(xì)胞條件培養(yǎng)液（epithelial cell conditioned medium，ECCM）體外誘導(dǎo)犬BMSCs 向上皮細(xì)胞分化的可行性。 方法 成年健康雄性比格犬1 只，體重10 kg。于犬髂后上棘采用骨髓穿刺法取骨髓5 mL，分離培養(yǎng)BMSCs。取犬口腔黏膜下組織，剪成約 4 mm × 4 mm 大小，制備ECCM。取第2 代BMSCs 以2 × 104 個(gè)/ 孔細(xì)胞密度接種，實(shí)驗(yàn)組于ECCM 中培養(yǎng)，對(duì)照組于低糖DMEM 完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。觀察兩組細(xì)胞形態(tài)特征，MTT 法繪制生長曲線，誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d 免疫組織化學(xué)染色鑒定上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物——細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin19，CK-19）和細(xì)胞角蛋白AE1/AE3，透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下見兩組細(xì)胞均呈長梭形，均勻分布，折光性較強(qiáng)，增殖迅速。兩組細(xì)胞生長曲線均呈“S”形，實(shí)驗(yàn)組生長曲線較對(duì)照組右移，提示ECCM 對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用。實(shí)驗(yàn)組CK-19 和細(xì)胞角蛋白AE1/AE3 免疫組織化學(xué)染色均呈陽性反應(yīng)，對(duì)照組呈陰性。透射電鏡下實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞胞漿內(nèi)可見緊密連接。 結(jié)論 ECCM 體外有誘導(dǎo)同種BMSCs 向上皮細(xì)胞分化的作用。
引用本文： 楊朋,魏人前,譚波,李秀群,王佳,周昆鵬,左瀟,李順,解慧琪. 上皮細(xì)胞條件培養(yǎng)液對(duì)BMSCs 分化的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(5): 612-616. doi: 復(fù)制
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