目的 研究PRP 對兔BMSCs 在體外向SC 分化中的作用，并對分化細胞的分泌功能進行檢測。 方法 取2 月齡新西蘭大白兔骨髓5 mL，應用密度梯度離心和貼壁篩選方法分離培養(yǎng)BMSCs。取兔股靜脈血5 mL，采用改良Appel 法制備PRP。取第3 代BMSCs 分為3 組，聯(lián)合誘導組：采用β- 巰基乙醇和維甲酸序貫誘導后用含PRP 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)；單純誘導組：行β- 巰基乙醇和維甲酸序貫誘導后，采用不含PRP 的L-DMEM 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)；對照組：不行誘導，僅采用L-DMEM 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。倒置顯微鏡下觀察各組細胞生長情況，于培養(yǎng)4、7、9、11 d 采用免疫熒光染色法對細胞進行鑒定，ELISA 法檢測NGF 含量，并于培養(yǎng)11 d 行RT-PCR 檢測NGF mRNA 表達。 結果 聯(lián)合誘導組和單純誘導組培養(yǎng)4 d，大部分細胞不具備BMSCs 典型細胞形態(tài)結構；9 d 聯(lián)合誘導組細胞均不具備BMSCs 典型細胞形態(tài)，呈類似SC 形態(tài)和外觀；對照組細胞形態(tài)一直無明顯改變。聯(lián)合誘導組和單純誘導組誘導培養(yǎng)后，各時間點均有S-100 蛋白表達；隨時間延長，兩組陽性表達率逐漸提高；培養(yǎng)7、9、11 d，聯(lián)合誘導組與單純誘導組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；對照組表達呈陰性。培養(yǎng)后4、7、9、11 d，NGF 含量聯(lián)合誘導組和單純誘導組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）；培養(yǎng)4 d 聯(lián)合誘導組與單純誘導組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）；培養(yǎng)7、9 和11 d，聯(lián)合誘導組與單純誘導組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。培養(yǎng)11 d，NGF mRNA 表達相對強度聯(lián)合誘導組較單純誘導組高，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結論 兔BMSCs 在體外一定條件下能誘導分化為可分泌NGF 的SC；誘導培養(yǎng)時聯(lián)合PRP 能明顯提高BMSCs 向SC 誘導的效率。
引用本文： 夏長所,陳玉華,孫康,田少奇,楊選影,洪光祥. PRP 在BMSCs 向SC 體外分化中的作用. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(8): 997-1001. doi: 復制
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