【摘 要】 目的 通過(guò)將轉(zhuǎn)染TGF-β3c2s2 基因的兔BMSCs 移植于兔耳瘢痕模型,觀(guān)察轉(zhuǎn)基因BMSCs 對(duì)創(chuàng)面愈合后增生性瘢痕形成的影響。 方法 成年健康日本大耳白兔20 只,體重1.7 ~ 2.5 kg,雌雄不拘。取第3 代兔BMSCs,經(jīng)Ad-TGF-β3c2s2 在感染復(fù)數(shù)150 下轉(zhuǎn)染,培養(yǎng)孵育24 h 后,調(diào)整細(xì)胞濃度為1×105/mL 備用。將純化、濃縮的Ad-TGF-β3c2s2顆粒,DMEM/F12(不含F(xiàn)BS)稀釋為1×108 pfu/mL 備用。于20 只日本大耳白兔雙側(cè)兔耳分別制備兩個(gè)2 cm × 2 cm 大小的腹側(cè)全層皮膚、軟骨缺損創(chuàng)面。將每只兔的4 個(gè)創(chuàng)面隨機(jī)分為空白對(duì)照組(A組)、Ad-TGF-β3c2s2 組(B組)、BMSCs 組(C組)和BMSCs/Ad-TGF-β3c2s2 組(D 組),并以自身正常皮膚作為正常對(duì)照(E 組)。將備好的細(xì)胞及病毒液分別按創(chuàng)面分組進(jìn)行局部移植。于術(shù)后21、45、90 d 行大體觀(guān)察、瘢痕硬度和厚度測(cè)定、HE 染色和免疫組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果 大體觀(guān)察:A、B、C 組上皮化后創(chuàng)面均逐漸形成不同程度的瘢痕,傷后45 d 瘢痕增生程度達(dá)高峰,明顯高出皮膚表面,持續(xù)至90 d,D 組在觀(guān)察期內(nèi)均無(wú)明顯高出周?chē)つw的瘢痕形成。術(shù)后45 d 和90 d,A、B、C 組瘢痕厚度和硬度明顯高于D 組,且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01),而B(niǎo) 組低于A(yíng)、C 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01);D 組愈合后創(chuàng)面厚度和硬度與正常皮膚接近。HE 染色觀(guān)察:A、C 組傷后45 d 可見(jiàn)淺層組織結(jié)構(gòu)排列紊亂,膠原纖維粗大,呈交錯(cuò)網(wǎng)織狀排列;B 組和D組結(jié)構(gòu)與正常皮膚接近,但較E 組膠原排列致密,表皮較A、C 組??;90 d 各組結(jié)構(gòu)與45 d 相似。BrdU 免疫組織化學(xué)觀(guān)察,傷后21、45 d,C、D 組均能見(jiàn)到散在分布、胞核染色陽(yáng)性的棕色細(xì)胞,A、B、E 組均為陰性。 結(jié)論 創(chuàng)面局部移植人TGF- β3c2s2 基因修飾的BMSCs,具有抑制創(chuàng)面愈合后增生性瘢痕的作用。
引用本文: 邱林,金先慶,Paul A Kingston,羅小輯,丁幸坡. 基因修飾BMSCs 抑制增生性瘢痕的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(2): 212-216. doi: 復(fù)制
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