目的 在體外運用人骨形成蛋白7(human bone morphogeneticprotein 7,hBMP7)基因重組35 型腺病毒(recombinant adenovirus’s containing fibers derived from Bgroup serotype 35，rAd5/F35) 誘導大鼠脂肪源性干細胞（adiposederived adult stem cell, ADASC）向成骨細胞定向分化，為骨組織工程探索新的細胞來源。 方法 以pcDNA1.1/氨芐青霉素-hBMP-7質粒為模板擴增hBMP-7基因，將回收的PCR產物片段克隆入pDC316載體，獲得重組質粒pDC316-hBMP-7。骨架質粒pBHG-fiber5/35和穿梭質粒pDC316-hBMP-7共轉染293細胞，同源重組產生rAd5/F35-hBMP-7。同樣的方法構建rAd5/F35增強型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)。在體外分別轉染大鼠ADASC并留置空白對照。觀察細胞形態(tài)和生長情況，ELISA檢測轉染基因的轉錄和表達，檢測鈣結節(jié)和骨鈣素等成骨細胞表型。 結果　PCR、酶切鑒定表明rAd5/F35－h(huán)BMP-7質粒構建正確。rAd5/F35-EGFP對大鼠ADASC中轉染效率可達90%以上，hBMP-7基因存在于轉染后的ADASC中并表達相應的蛋白，誘導組鈣結節(jié)形成，電鏡見胞質中有鈣質成分，堿性磷酸酶陽性，骨鈣素表達增強。 結論 rAd5/F35介導hBMP-7基因可促進ADASC向成骨細胞定向分化。

引用本文： 康焱,廖威明,袁振華,張瓏涓,原向偉,雷磊,黃保丁. 重組35 型腺病毒介導人骨形成蛋白基因對脂肪源性干細胞的誘導分化. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(2): 125-129. doi: 復制

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