目的 探討青蒿琥酯(artesunate，Art)誘導(dǎo)皮膚瘢痕成纖維細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制。 方法 取自愿捐獻(xiàn)的人耳垂增生性瘢痕，采用組織塊貼壁法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。經(jīng)免疫組織化學(xué)染色鑒定后，取第3～5代成纖維細(xì)胞，采用含60、120和240 mg/L Art培養(yǎng)液各5 ml培養(yǎng)作為實(shí)驗(yàn)組，僅加入等量的培養(yǎng)液作為對(duì)照組。于倒置顯微鏡及透射電鏡觀察，采用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期。另取第3～5代成纖維細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組采用30、60和120 mg/L Art培養(yǎng)液，對(duì)照組僅加入等量的培養(yǎng)液，觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子的變化。 結(jié)果 原代成纖維細(xì)胞呈典型的梭形貼壁生長，免疫組織化學(xué)鑒定細(xì)胞波形蛋白呈陽性表達(dá)；倒置顯微鏡下觀察Art在60~240 mg/L濃度范圍內(nèi)抑制成纖維細(xì)胞生長且呈劑量及時(shí)間依賴性，細(xì)胞出現(xiàn)凋亡征象；透射電鏡觀察，各實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)染色質(zhì)濃縮，沿著核膜排列，甚至核碎裂現(xiàn)象。細(xì)胞周期分析顯示各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，凋亡細(xì)胞比例、處于G0～G1、S、G2～M期細(xì)胞數(shù)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組均出現(xiàn)典型的凋亡峰，且隨藥物濃度增加，峰值越大。Art在30~120 mg/L作用成纖維細(xì)胞 24 h可引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度持續(xù)增加，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論 Art通過作用于成纖維細(xì)胞周期誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高可能是其誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一。

引用本文： 孔恒,余清聲,朱柳,袁牧,王肅生,冀航,張志華,梁剛,黃宗海. 青蒿琥酯誘導(dǎo)瘢痕成纖維細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(9): 970-974. doi: 復(fù)制

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