目的 觀察年齡因素對骨髓間充質(zhì)干細胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)成骨分化能力的影響;了解基因治療對老年大鼠MSCs成骨分化能力的影響。 方法 1月齡(幼年組)、9月齡(成年組)及24月齡(老年組)雄性Wistar大鼠各6只,取MSCs經(jīng)體外分離、培養(yǎng)及攜帶骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因的腺病毒載體(Ad-BMP-2)轉(zhuǎn)染后,定量檢測BMP-2、堿性磷酸酶(alkaline phosphate,ALP)表達,以及成骨細胞標志性蛋白:Ⅰ型膠原、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨橋素(osteopontin, OPN)的表達。將轉(zhuǎn)染的各組MSCs分別與磷酸三鈣(tricalcium phosphate, TCP)復(fù)合后植入裸鼠體內(nèi),3周后取材,比較各組誘導(dǎo)異位成骨能力。 結(jié)果 ELISA檢測表明BMP-2基因修飾的MSCs可以有效表達BMP-2,且表達量在各年齡組間差異無統(tǒng)計學意義(P gt;0.05);各組ALP于誘導(dǎo)后第9天達高峰,但組間差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);誘導(dǎo)后第7天,RT-PCR半定量檢測示各組均有成骨細胞特征性蛋白,即:Ⅰ型膠原、OPN及BSP的明顯表達,表達量在各組間差異無統(tǒng)計學意義(P gt;0.05);BMP2基因轉(zhuǎn)染的MSCs與TCP復(fù)合后可誘導(dǎo)裸鼠體內(nèi)異位成骨,各組成骨量差異無統(tǒng)計學意義(P gt;0.05)。 結(jié)論 BMP-2基因修飾的老年大鼠MSCs可以恢復(fù)成骨分化能力,基因治療可能為老年性骨骼疾病提供一種新的治療途徑。
引用本文: 岳冰,陳燕飛,湯亭亭,陸斌,郁朝鋒,樓覺人,戴克戎. 骨形成蛋白2基因修飾的老年大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化能力的研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2006, 20(1): 53-57. doi: 復(fù)制
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