目的 比較用不同的方法脫細(xì)胞處理異種(豬)角膜基質(zhì)制備組織工程角膜支架材料,并對(duì)其生物相容性進(jìn)行研究。 方法 成年York豬角膜基質(zhì)材料,以Triton聯(lián)合0.25%胰酶,處理30 min~3 h為材料1;Triton聯(lián)合DNARNA酶,處理8~14 h為材料2;Triton聯(lián)合0.25%胰酶、DNARNA酶,處理3~5 h為材料3。3種材料用無(wú)水氯化鈣脫水干燥保存。在材料上接種兔角膜基質(zhì)成纖維細(xì)胞,觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。新西蘭大白兔24只,隨機(jī)分為3組,每組8只。右眼為實(shí)驗(yàn)眼,左眼為空白對(duì)照眼。將材料植入兔眼角膜基質(zhì)層中,術(shù)后每日裂隙燈檢查術(shù)眼;1、4、8和12周分別隨機(jī)取2只兔眼角膜作HE染色,觀(guān)察材料的生物相容性。 結(jié)果 材料1、2細(xì)胞脫出不完全,處理最佳時(shí)間分別是2 h和10~12 h,角膜基質(zhì)網(wǎng)狀間隙無(wú)明顯增大;接種兔角膜基質(zhì)成纖維細(xì)胞后,3~4 d細(xì)胞死亡;植入兔角膜基質(zhì)中有明顯的免疫排斥反應(yīng)。材料3脫出細(xì)胞完全,其脫細(xì)胞處理的最佳時(shí)間為4 h,角膜基質(zhì)纖維結(jié)構(gòu)無(wú)破壞,呈三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀間隙明顯增大;接種兔角膜基質(zhì)成纖維細(xì)胞后,細(xì)胞在材料
上貼附生長(zhǎng)良好;將其植入兔角膜基質(zhì)中無(wú)炎性及排斥反應(yīng),可逐漸降解吸收,有良好的生物相容性。 結(jié)論 Triton聯(lián)合0.25%胰酶、DNARNA酶法處理的異種(豬)角膜基質(zhì)具有良好的生物相容性,可作為一種組織工程角膜的支架材料。
引用本文: 張超,金巖,聶鑫,劉源,雷娟,胡丹. 組織工程角膜生物材料載體制備的比較性研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2006, 20(2): 185-188. doi: 復(fù)制
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