目的 建立C57/BL6小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（marrow mesenchymal stem cells,MSCs）的體外分離和培養(yǎng)體系,探討酒精及其代謝物對(duì)MSCs的毒性。方法 從C57/BL6小鼠的股骨骨髓中分離MSCs，通過優(yōu)化細(xì)胞的培養(yǎng)方法進(jìn)行有效培養(yǎng)、傳代，最終獲得純度較高的MSCs，并對(duì)第4代細(xì)胞進(jìn)行CD90和CD34免疫組織化學(xué)染色鑒定。對(duì)第2代細(xì)胞以4×105個(gè)/ml密度接種于96孔板，每孔200 μl，第2天以用乙醇及乙醛進(jìn)行染毒，劑量設(shè)計(jì)為乙醇5.7、17.0、50.0、100.0、150.0 mmol/L, 乙醛4.5、0.9、0.18、0.036、0.007 2、0.001 44、0.000 288 mmol/L，對(duì)照組為MSCs以不加乙醇及乙醛的10%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)。3 d后MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖活性。結(jié)果 MSCs在前6代表現(xiàn)出較好的穩(wěn)定性和旺盛的自我增殖能力，免疫組織化學(xué)染色顯示第4代MSCs CD90呈陽(yáng)性、CD34呈陰性。MTT檢測(cè)乙醇在17.0、100.0及150.0 mmol/L時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞增殖抑制，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；乙醛 gt;0.18 mmol/L時(shí)隨著濃度增加細(xì)胞增殖力減弱，在4.5 mmol/L時(shí)出現(xiàn)了細(xì)胞增殖抑制，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) 。結(jié)論 優(yōu)化培養(yǎng)體系能有效分離和培養(yǎng)MSCs，乙醇和乙醛均能抑制其增殖，表現(xiàn)出毒性作用，乙醛的毒性作用較乙醇強(qiáng)，其造成的損傷更不容忽視。
引用本文： 李紅,屈衛(wèi)東,吳德生,王霞. C57/BL6小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外優(yōu)化培養(yǎng)和酒精及其代謝物毒性效應(yīng)的探討. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2006, 20(4): 471-474. doi: 復(fù)制
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