目的 研究人骨形成蛋白2腺病毒表達(dá)載體（adenovirusmediated human bone morphogenetic protein 2 gene，Ad-hBMP-2）轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)兔腰椎間盤細(xì)胞，分析其對腰椎間盤細(xì)胞的影響。方法 成年健康新西蘭大白兔4只，體重4~5 kg，取L 2、L3到L6、L7節(jié)段椎盤細(xì)胞體外培養(yǎng)。利用免疫熒光和蛋白印跡法(Western blot)檢測空白對照組(未轉(zhuǎn)染)、Ad-LacZ組［感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection, MOI)150MOI］和不同劑量Ad-hBMP-2(50、100、150 MOI)組轉(zhuǎn)染后細(xì)胞hBMP-2的表達(dá)水平。采用RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA表達(dá)水平。結(jié)果 轉(zhuǎn)染Ad-hBMP-2后通過免疫熒光和蛋白印跡法可見隨轉(zhuǎn)染劑量增加hBMP-2表達(dá)量逐漸增加,與50 MOI組比較100 MOI組升高102%，150 MOI組升高183%。在轉(zhuǎn)染后第6天RT-PCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染組aggrecan和Ⅱ型膠原mRNA的表達(dá)高于對照組，并且隨轉(zhuǎn)染劑量增高mRNA的表達(dá)量均逐漸增加。aggrecan mRNA從50 MOI組的61.7%增加到150 MOI組的167.3%。Ⅱ型膠原mRNA從50 MOI組的77.3%增加到150 MOI組的169.0%。結(jié)論Ad-hBMP-2可高效轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)兔腰椎間盤細(xì)胞，隨轉(zhuǎn)染劑量增加hBMP-2表達(dá)量逐漸增加，同時上調(diào)aggrecan和Ⅱ型膠原mRNA的表達(dá),并存在劑量依賴關(guān)系。 

引用本文： 顧海倫,呂剛,劉莉,李建軍,黃濤,王佳. 人骨形成蛋白2腺病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)兔腰椎間盤細(xì)胞的研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2006, 20(8): 820-824. doi: 復(fù)制

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