目的探討Ⅳ型膠原蛋白在乳腺癌中的表達(dá)情況及其與臨床病理間的關(guān)系。方法應(yīng)用Ⅳ型膠原蛋白單克隆抗體，采用鏈親和素（LSAB）法檢測(cè)93例乳腺惡性腫瘤及5例良性腫瘤組織中Ⅳ型膠原蛋白的表達(dá)。結(jié)果Ⅳ型膠原蛋白表達(dá)與乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)受累、生存時(shí)間及腫瘤大小有關(guān)。Ⅳ型膠原蛋白表達(dá)缺乏組5年生存率為29.69%，明顯低于表達(dá)完整組的5年生存率（81.43%），P＜0.05； 隨著腫瘤的長(zhǎng)大，Ⅳ型膠原表達(dá)完整率由53.8%降至10.3%，兩者間呈正相關(guān)（r=0.219）。結(jié)論檢測(cè)Ⅳ型膠原在乳腺癌基底膜中的表達(dá)狀況，將有助于乳腺癌預(yù)后的判斷及治療方案的制訂。
目的 觀察乳腺良性疾病不典型增生癌變過(guò)程中基底膜的變化。 方法采用SP免疫組化染色法和兩種特殊染色方法(Foot及PAS染色法)，并利用電鏡觀察基底膜的變化。 結(jié)果 Ⅱ級(jí)不典型增生的乳腺組織已有基底膜的變化，Ⅲ級(jí)不典型增生時(shí)基底膜的變化更明顯，主要表現(xiàn)為光鏡下基底膜明顯厚薄不均，電鏡下則可見(jiàn)小的缺失，而乳腺癌組織中基底膜完全缺如。結(jié)論 在乳腺上皮細(xì)胞癌變過(guò)程中基底膜的變化與乳腺上皮細(xì)胞的變化密切相關(guān)，是乳腺上皮不典型增生癌變過(guò)程的一部分。
【摘 要】 目的 比較不同化學(xué)方法制備去細(xì)胞神經(jīng)支架的效果，提供有效的組織工程神經(jīng)支架。 方法 2 月齡雄性SD 大鼠15 只，體重200 ～ 250 g，取雙側(cè)坐骨神經(jīng)，隨機(jī)分為3 組，每組10 條。根據(jù)處理方法不同，A 組為正常未處理組；B 組為傳統(tǒng)Sondell 法化學(xué)處理組；C 組為采用Triton X-200、SB-10、SB-16 處理的改良法組。制備后行HE 染色、免疫組織化學(xué)染色及掃描電鏡觀察，并對(duì)去細(xì)胞程度、脫髓鞘程度及神經(jīng)纖維管道完整性進(jìn)行量化評(píng)價(jià)。 結(jié)果 HE 染色：A 組神經(jīng)纖維橫斷面呈圓形，胞核呈深藍(lán)色，髓鞘呈網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)；B 組軸突及細(xì)胞核均消失，神經(jīng)內(nèi)膜結(jié)構(gòu)破壞明顯；C 組軸突及細(xì)胞核均消失，神經(jīng)內(nèi)膜形成不規(guī)則圓形空腔。層粘連蛋白免疫組織化學(xué)染色：A 組基底膜圍繞在髓鞘外周，中間有藍(lán)染SC 核；B 組SC 核及髓鞘結(jié)構(gòu)消失，神經(jīng)基底膜結(jié)構(gòu)不完整；C 組SC 核及髓鞘結(jié)構(gòu)消失，神經(jīng)基底膜形成不規(guī)則圓形空腔。S-100 蛋白免疫組織化學(xué)染色：A 組SC 及髓鞘呈棕褐色；B 組及C 組未見(jiàn)明顯髓鞘染色。掃描電鏡觀察：A 組髓鞘、軸突等內(nèi)容物形態(tài)清晰；B 組髓鞘、軸突等結(jié)構(gòu)均消失，基膜管壁排列欠規(guī)則；C 組基膜管壁膠原纖維排列有序。去細(xì)胞程度及髓鞘染色深度評(píng)分：B、C 組均優(yōu)于A 組（P lt; 0.05），其中髓鞘染色深度評(píng)分C 組均優(yōu)于B 組（P lt; 0.05）；神經(jīng)纖維管道完整性評(píng)分：C 組優(yōu)于B 組（P lt; 0.05），與A 組相似（P gt; 0.05）；綜合評(píng)價(jià)去細(xì)胞處理方法以C 組方法為佳。 結(jié) 論 改良法所獲得的去細(xì)胞神經(jīng)的去細(xì)胞效果與傳統(tǒng)Sondell 法相似，而脫髓鞘及組織結(jié)構(gòu)保留的效果優(yōu)于后者，可作為一種新的神經(jīng)支架材料。
目的 尋找最適于組織工程皮膚生長(zhǎng)及基底膜構(gòu)建的體外培養(yǎng)基鈣濃度。 方法 按照魯元?jiǎng)偟冉⒌姆椒ㄖ苽鋸?fù)方殼多糖組織工程皮膚，根據(jù)培養(yǎng)基鈣濃度不同，分為1.00、1.45、1.65和1.95 mmol/L四組。在37℃、5% CO2及90%以上濕度孵箱內(nèi)浸沒(méi)培養(yǎng)3 d后，將培養(yǎng)物置于不銹鋼篩網(wǎng)上進(jìn)行氣液界面三維培養(yǎng)，每天換液1次。培養(yǎng)7、15 d，行HE、PAS染色觀察組織工程皮膚的組織學(xué)特性；并利用免疫組織化學(xué)染色對(duì)基底膜的主要成分——Ⅳ型膠原進(jìn)行觀察，評(píng)價(jià)基底膜構(gòu)建情況。 結(jié)果 各組組織工程皮膚組織學(xué)觀察類似正常皮膚,有分化良好的表皮和致密真皮，但1.95 mmol/L組表皮分化較其他組更好；1.00、1.45及1.65 mmol/L組角化層外側(cè)常伴未角化的角質(zhì)形成細(xì)胞，1.95 mmol/L組表皮細(xì)胞角化完全，且與顆粒層細(xì)胞結(jié)合牢固。PAS染色顯示各組真、表皮間有紫紅色帶狀結(jié)構(gòu)；免疫組織化學(xué)染色顯示真皮與表皮間Ⅳ型膠原反應(yīng)呈陽(yáng)性，且1.95 mmol/L組陽(yáng)性反應(yīng)強(qiáng)于1.00 mmol/L組。 結(jié)論 鈣濃度為1.95 mmol/L的培養(yǎng)基最適合于復(fù)方殼多糖組織工程皮膚生長(zhǎng)及基底膜構(gòu)建。
本文對(duì)現(xiàn)行生理學(xué)教科書(shū)和參考書(shū)在闡明人耳傳聲原理中存在的一些問(wèn)題進(jìn)行有理有據(jù)的論證, 提出筆者的見(jiàn)解, 彌補(bǔ)文獻(xiàn)不足。運(yùn)用物理學(xué)的杠桿知識(shí)和聲學(xué)理論, 提出錘骨柄的等效簡(jiǎn)化模型, 使之符合作為杠桿長(zhǎng)臂的要求; 構(gòu)造成一個(gè)聽(tīng)骨鏈組合杠桿, 建立聽(tīng)骨鏈的等效簡(jiǎn)化模型。將此模型分解成兩個(gè)簡(jiǎn)單杠桿, 在分析論證兩個(gè)簡(jiǎn)單杠桿的基礎(chǔ)上, 推導(dǎo)出組合等效杠桿的原理公式。通過(guò)計(jì)算和對(duì)比外耳道空氣和內(nèi)耳淋巴液中的聲位移振幅得出結(jié)論:對(duì)減少聲位移振幅以適應(yīng)基底膜的承受限度起關(guān)鍵作用的因素是淋巴液的密度和聲速遠(yuǎn)比空氣的密度和聲速高。
目的探討人體外泌汗腺組織體外三維培養(yǎng)方法，并對(duì)構(gòu)建的三維組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析。 方法取整形手術(shù)患者自愿捐贈(zèng)的正常腹部全層皮膚，經(jīng)Ⅱ型膠原酶消化分離人體外泌汗腺組織，以含5 ng/mL重組人EGF、25 mg/mL牛垂體提取物、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素的無(wú)血清角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。待原代細(xì)胞達(dá)80%融合后，調(diào)整細(xì)胞濃度至1×105個(gè)/mL；取0.3 mL細(xì)胞懸液與0.3 mL Matrigel基底膜基質(zhì)混勻培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。培養(yǎng)14 d后，取標(biāo)本行冰凍切片，HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)細(xì)胞角蛋白7（cytokeratin 7，CK7）和CK19抗原表達(dá)。 結(jié)果倒置相差顯微鏡觀察示，經(jīng)Ⅱ型膠原酶消化后大量汗腺組織游離；貼壁后3～5 d長(zhǎng)出汗腺細(xì)胞，細(xì)胞持續(xù)分裂達(dá)2～3周，形成圍繞汗腺組織塊的環(huán)狀單層；3～4周后細(xì)胞衰老。汗腺細(xì)胞接種于Matrigel基底膜基質(zhì)中2～3 d，細(xì)胞開(kāi)始分裂，隨后形成小細(xì)胞團(tuán)、管狀結(jié)構(gòu)以及類球狀結(jié)構(gòu)；約2周時(shí)混合培養(yǎng)物開(kāi)始液化，培養(yǎng)終止。HE染色示部分細(xì)胞形成中空管狀結(jié)構(gòu)，管壁由1～2層細(xì)胞構(gòu)成，類似于在體汗腺的分泌部和導(dǎo)管部；免疫組織化學(xué)染色見(jiàn)培養(yǎng)的汗腺細(xì)胞CK7和CK19表達(dá)均呈陽(yáng)性。 結(jié)論人汗腺細(xì)胞接種于Matrigel基底膜基質(zhì)三維培養(yǎng)，形成的組織結(jié)構(gòu)模擬了在體汗腺的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。
血漿置換能夠迅速清除血液循環(huán)中的致病性抗原、抗體以及免疫復(fù)合物等致病因子，已成為自身免疫性疾病重要的輔助治療手段之一。雙重濾過(guò)血漿置換作為新型血漿置換模式，由于其受血漿資源的限制少，在免疫性疾病中的使用越來(lái)越廣泛。該文報(bào)道一例雙重濾過(guò)血漿置換成功治療重癥抗腎小球基底膜病的患者，結(jié)合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)進(jìn)行分析，對(duì)雙重濾過(guò)血漿置換在常見(jiàn)免疫性疾病中的應(yīng)用進(jìn)行綜述，以期對(duì)雙重濾過(guò)血漿置換在臨床中的使用提供參考。