目的:研究離體肝臟缺血再灌注期間絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導途徑對腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor α,TNFα )mRNA表達的影響。方法:建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12)灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190,抑制組(n=12)灌注液中加入SB202190(濃度為3μmol/L)。分別于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10min、30min、60min及120min時獲取離體肝組織標本。應用Western-blot法及免疫沉淀法檢測離體肝組織中p38MAPK表達的水平及活性,RT-PCR法檢測TNF-α-mRNA表達水平。結果:對照組p38MAPK活性在冷保存末及再灌注10min、30min、60min均較離體前和再灌注120min顯著升高(Plt;0.01),也顯著高于同時相點的抑制組(Plt;0.01);抑制組p38MAPK活性在組內(nèi)各時相點的變化無顯著性差異(Pgt;0.05)。兩組肝臟于離體前、冷保存末及再灌注10min及30min,肝組織中僅有少量TNF-α mRNA表達,組間及組內(nèi)比較無顯著性差異(Pgt;0.05);至再灌注60min及120min,對照組TNF-α mRNA的表達水平顯著性高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.01),而抑制組雖然也顯著高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.05),但卻顯著性低于同時相點對照組的表達水平(Plt;0.01)。離體再灌注期間供肝組織中p38MAPK活性與供肝組織內(nèi)TNF-α mRNA的表達水平呈顯著性正相關(r=0.996,Plt;0.01)。結論:p38MAPK對TNF-α生成的調(diào)節(jié)作用層次可能在轉(zhuǎn)錄水平,提示p38MAPK信號轉(zhuǎn)導途徑對TNF-α mRNA的調(diào)節(jié)可能是導致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機制之一。
目的:研究離體肝臟缺血再灌注期間絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導途徑對細胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecular 1,ICAM1)mRNA表達的影響。方法:建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12):灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190,抑制組(n=12):灌注液中加入SB202190(濃度為3μmol/L)。于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10min、30min、60min及120min時獲取離體肝組織標本。分別應用Western-blot法及免疫沉淀法檢測離體肝組織中p38MAPK表達的水平及活性,原位雜交法檢測ICAM1 mRNA表達水平。結果:與離體前相較,對照組p38MAPK活性在冷保存末及再灌注10min、30min、60min顯著性增高(Plt;0.01),而再灌注120min時活性與離體前相較無明顯差異(Pgt;0.05);抑制組p38MAPK活性在各時相點的變化無顯著性差異(Pgt;0.05),除離體前及再灌注120min兩組肝臟的p38MAPK活性無顯著性差異外,其余各時相點p38MAPK活性均顯著性低于對照組(Plt;0.01)。離體前、冷保存末及再灌注10min及30min時,兩組肝組織中僅有少量ICAM1 mRNA表達,組間及組內(nèi)比較無顯著性差異(Pgt;0.05);至再灌注60min及120min,對照組ICAM1 mRNA的表達水平顯著性高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.01),而抑制組雖然也顯著高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.05),但卻顯著性低于同時相點對照組的表達水平(Plt;0.01)。離體再灌注期間供肝組織中p38MAPK活性與供肝組織內(nèi)ICAM1 mRNA的表達水平呈顯著性正相關(r=0.985,Plt;0.01)。結論:p38MAPK對ICAM1生成的調(diào)節(jié)作用層次可能在轉(zhuǎn)錄水平,提示p38MAPK信號轉(zhuǎn)導途徑對ICAM1 mRNA的調(diào)節(jié)可能是導致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機制之一。
目的 研究離體肝臟缺血再灌注早期絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導途徑對腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA和細胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM1) mRNA表達的影響。方法 建立兔離體肝臟缺血再灌注模型，對照組（n=12）： 灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190； 抑制組（n=12）： 灌注液中加入SB202190（濃度3 μmol/L）。分別于肝臟離體前，冷保存末，再灌注10、30、60及120 min時獲取肝組織標本。分別應用Western blot法及免疫沉淀法檢測肝組織中p38MAPK蛋白的表達及活性； RT-PCR法檢測肝組織中TNF-α mRNA的表達水平，原位雜交法檢測肝組織中ICAM1 mRNA的表達水平。結果 2組動物肝組織中p38MAPK蛋白的表達水平各時相均無明顯改變（P＞0.05），且2組間其表達水平的差異也無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。對照組肝組織中p38MAPK的活性在冷保存末及再灌注10、30及60 min時均較離體前和再灌注120 min時明顯升高(P＜0.01),也明顯高于同時相的抑制組(P＜0.01)； 抑制組p38MAPK活性各時相的變化差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。離體前、冷保存末及再灌注10及30 min，2組的肝組織中均僅有少量TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA表達，組間及組內(nèi)比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）； 至再灌注60及120 min，2組TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA的表達水平均明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），但抑制組相應時相的表達水平明顯低于對照組（P＜0.01）。離體再灌注期間肝組織中p38MAPK的活性與TNF-α mRNA及ICAM1 mRNA的表達水平呈正相關（r=0.996,P＜0.01； r=0.985,P＜0.01）。結論 p38MAPK可能是在轉(zhuǎn)錄水平對TNF-α和ICAM1的生成發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，p38MAPK信號轉(zhuǎn)導途徑對TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA的調(diào)節(jié)可能是導致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機理之一。
目的 研究老年急性膽囊炎患者的手術方式。方法 回顧性分析我院近13年間行手術治療的149例老年（年齡≥60歲）急性膽囊炎患者的臨床資料，根據(jù)手術方式分為開腹膽囊切除組（OC組，n＝76）和腹腔鏡膽囊切除組（LC組，n＝73例）。比較2組患者手術時間、術中出血量、術后進食時間、腸道功能恢復時間、住院時間及并發(fā)癥情況。結果 OC組患者與LC組患者的一般情況除WBC計數(shù)和膽囊B超情況外，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）； OC組術中出血量顯著高于LC組，手術時間也顯著長于LC組（P＜0.01）。OC組住院時間、進食時間及腸功能恢復時間均顯著長于LC組（P＜0.01）。在并發(fā)癥發(fā)生上，OC組有36例次，LC組有11例次，2組間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。結論 老年急性膽囊炎患者的手術治療應遵循個體化原則，選擇OC或LC要視患者的總體情況而定，但均應以保證患者的安全為前提。
目的 拓展微創(chuàng)技術在胰腺周圍膿腫(簡稱胰周膿腫)中的應用，總結膽道鏡治療胰周膿腫的經(jīng)驗和體會。 方法 回顧性分析我科2000年12月至2008年12月期間收治的36例胰周膿腫患者的臨床資料,經(jīng)超聲介入穿刺置管，逐級擴張竇道，膽道鏡清創(chuàng)，引流治療，根據(jù)胰周壞死組織特點，充分利用膽道鏡的靈活性，全方位多角度反復鉗取、網(wǎng)取、負壓吸引、徹底清除壞死組織和膿苔?！〗Y果 全組36例施行B超介入穿刺置管引流，行單管穿刺置管3例，雙管穿刺置管7例，三管穿刺置管及以上26例; 膽道鏡清創(chuàng)次數(shù)3~14次，平均5.6次。有6例患者經(jīng)1～2次膽道鏡清創(chuàng)后全身癥狀改善，血常規(guī)和體溫恢復正常，飲食恢復,可帶管出院。住院時間25～132 d，平均76 d。經(jīng)膽道鏡清創(chuàng)治愈33例, 治愈率為91.7%(33/36); 2例因胰周壞死組織范圍較大，同時伴有腹腔內(nèi)多處膿腫加行開腹清創(chuàng)引流，術后恢復較好，治愈出院; 1例因并發(fā)嚴重多器官功能衰竭死亡。本組發(fā)生出血2例,腸外瘺3例?！〗Y論 膽道鏡對胰周膿腫清創(chuàng)方法簡單、操作靈活、療效可靠，改變了胰周膿腫只能手術引流的觀點，減少了患者的創(chuàng)傷，實現(xiàn)了“微創(chuàng)損傷控制”的理念。
目的 探討腫瘤細胞裂解物致敏的樹突狀細胞（DC）作為佐劑對結腸癌LoVo細胞系的殺傷作用。方法 反復凍融法裂解培養(yǎng)的結腸癌LoVo細胞，提取細胞抗原并致敏DC，然后將后者與自身T淋巴細胞共同培養(yǎng)，觀察其對自身T淋巴細胞增殖的影響以及活化的T淋巴細胞對LoVo細胞的殺傷作用。結果 結腸癌LoVo細胞裂解物致敏的DC能明顯促進T淋巴細胞的增殖，后者對LoVo細胞的殺傷作用明顯增強。結論 腫瘤細胞裂解物提取方法簡單，易于臨床實施，其作為細胞抗原致敏DC制備的腫瘤疫苗能有效活化并產(chǎn)生腫瘤特異性細胞毒T淋巴細胞，將有很好的臨床應用前景。
目的比較經(jīng)PTC或ERC兩種途徑放置膽道支架治療惡性膽管梗阻的療效。方法PTC途徑： 在超聲引導下選擇膽管走行與膽總管夾角較大、擴張的左右肝內(nèi)膽管，穿刺置管引流，1周后再置入支架，共68例（其中有2例系ERC途徑失敗者）。 ERC途徑： 在十二指腸鏡下逆行插入引流管于膽總管內(nèi)，經(jīng)造影顯示梗阻部位，其引導絲通過梗阻部位，然后沿引導絲置入支架，共53例。 結果經(jīng)PTC或ERC途徑放置支架成功率分別為100%（68/68）和96.2%(51/53)， 2組均未發(fā)生出血及漏膽并發(fā)癥。 全部患者獲隨訪1～18個月（平均12.4個月），結果PTC組和ERC組放置支架后6個月內(nèi)死亡者分別為7和5例，18個月仍存活者分別為17和9例。 結論對失去手術機會或不能耐受手術的惡性膽管梗阻患者采取支架置入是有效解除梗阻、延長生存時間和提高生存質(zhì)量的最佳方法。 位于膽總管下端和壺腹部的梗阻首選ERC途徑放置支架； 位于肝門部及以上的梗阻應以PTC途徑放置支架為宜。
目的 總結使用膽道球囊擴張器防治肝膽管結石合并膽道出血術后再出血的臨床經(jīng)驗。方法 對我院2003～2008年間將膽道球囊擴張器預防性用于肝膽管結石術后11例膽道出血者的臨床資料進行回顧性分析。結果 11例中男7例,女4例。本院手術3例，外院轉(zhuǎn)診8例。手術止血后對疑有再出血可能的患者在膽道鏡引導下于肝內(nèi)膽道出血部位預置膽道球囊擴張器備用。術后3～7 d內(nèi)有4 例再發(fā)明顯膽道出血，開放球囊擴張器壓迫出血膽管，壓迫2 h后減壓0.5 h,如此反復交替進行。4例均用球囊擴張器壓迫止血成功，其中1例止血后5 d再次出血，仍用同法止血。11例患者全部存活。結論 肝膽管結石并發(fā)的肝內(nèi)膽道出血，行手術止血后可能再發(fā)出血； 于出血部位預置膽道球囊擴張器使得術后出血的治療簡單、有效，可作為膽道再出血的防治措施之一。