目的 研究豬脫細胞真皮基質(zhì)修復(fù)兔腹壁缺損的效果,探討異種脫細胞真皮基質(zhì)應(yīng)用的可行性。 方 法 健康小白豬1 頭,取背部及兩側(cè)皮膚制備脫細胞真皮基質(zhì)。26 只日本大耳白兔,雌雄不限,體重2.2 ~ 2.3 kg,隨機分為對照組(n=6)和實驗組(n=20)。對照組制備5.0 cm × 0.5 cm 腹壁缺損,單純縫合關(guān)閉缺損。實驗組制備5.0 cm × 2.5 cm 腹壁缺損,用同樣大小的豬脫細胞真皮基質(zhì)補片(簡稱“補片”)修復(fù),補片基底膜面朝向腸管。術(shù)后觀察是否有疝形成,比較兩組腹腔內(nèi)臟器粘連情況,以及對照組腹壁肌筋膜單純縫合處和實驗組補片- 腹壁肌筋膜吻合處的最大張力,組織學(xué)觀察補片是否有纖維血管組織長入及其在體內(nèi)的生物學(xué)轉(zhuǎn)歸。 結(jié)果 實驗動物均無疝形成。術(shù)后5 周,實驗組補片和腹壁融為一體,補片皮膚面和臟器面均有纖維血管組織長入,補片處于新生組織摻入重建過程。實驗組1 只動物補片和腹腔內(nèi)臟器粘連較重(2 級),5 只發(fā)生了輕微粘連(1 級),12 只無粘連(0 級);對照組1 只輕微粘連(1 級),5 只無粘連(0 級);兩組粘連分級比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z= —0.798,P=0.425)。術(shù)后5 周,實驗組補片- 腹壁肌筋膜吻合處的最大張力為(13.0 ± 5.5)N,對照組腹壁肌筋膜單純縫合處為(13.6 ± 4.0)N,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t= —0.410,P=0.683)。組織學(xué)觀察顯示,術(shù)后5 周,實驗組補片中有大量小血管,并有中性粒細胞及淋巴細胞為主的炎性浸潤,補片邊緣偶見巨噬細胞,補片- 腹壁肌筋膜吻合處由纖維結(jié)締組織連接;術(shù)后6 個月,補片及周圍炎性反應(yīng)消退,膠原纖維結(jié)構(gòu)發(fā)生了改建,補片和肌筋膜層由有纖維結(jié)締組織愈合。 結(jié)論 補片修復(fù)兔腹壁缺損取得了較好效果,補片- 腹壁肌筋膜層愈合,其吻合處的力學(xué)強度達到了自體腹壁單純縫合吻合的力學(xué)強度,補片膠原纖維結(jié)構(gòu)發(fā)生了改建。
目的? 比較豬脫細胞真皮基質(zhì)(porcine acellular dermal matrix,PADM)加大鼠自體刃厚皮與單純大鼠自體刃厚皮修復(fù)全層皮膚缺損的效果,組織學(xué)觀察 PADM 在大鼠體內(nèi)的轉(zhuǎn)歸。? 方法 健康雌性 SD 大鼠 20 只,體重 200 ~ 225 g。于每只大鼠背部左側(cè)翻起 4.0 cm × 2.5 cm 皮瓣,達深筋膜,皮下植入 4.0 cm × 2.5 cm 拉網(wǎng)的 PADM,10 ~ 14 d 待植入的 PADM 血管化后,沿原切口處將左側(cè) 4.0 cm × 2.5 cm 皮瓣切下,右側(cè)背部也制作 4.0 cm × 2.5 cm 全層皮膚缺損創(chuàng)面,兩側(cè)切除的全層皮膚用鼓式取皮機反取為 0.2 mm 厚刃厚皮片,分別植入左側(cè) PADM 上(實驗組)和右側(cè)皮膚缺損(對照組)。術(shù)后 2、4、8、20 周,觀察創(chuàng)面愈合情況,計算創(chuàng)面愈合率和創(chuàng)面收縮率,并對創(chuàng)面行組織學(xué)觀察。? 結(jié)?果 術(shù)后2周大體觀察,實驗組自體刃厚皮與PADM貼合良好,大部分復(fù)合皮泛紅成活;對照組自體刃厚皮創(chuàng)面絕大部分泛紅成活。組織學(xué)觀察,實驗組 PADM 內(nèi)有大量成纖維細胞長入,少量中性粒細胞和淋巴細胞浸潤,周圍可見巨噬細胞;對照組自體刃厚皮下纖維結(jié)締組織充填。術(shù)后4~8周大體觀察,實驗組大部分創(chuàng)面愈合,復(fù)合皮挾起時皮片厚,柔軟、豐滿,有彈性;對照組創(chuàng)面基本愈合,但挾起時皮片薄弱。組織學(xué)觀察,實驗組 PADM 內(nèi)炎性浸潤逐步消退;對照組自體刃厚皮下層狀排列的膠原纖維束平行于表面。術(shù)后 20 周大體觀察,實驗組復(fù)合皮與周圍皮膚結(jié)合部平坦,復(fù)合皮柔軟、豐滿;對照組皮片薄,彈性較差。組織學(xué)觀察, PADM 內(nèi)及周圍未見炎性浸潤,膠原纖維組織結(jié)構(gòu)與自體皮接近;對照組自體刃厚皮皮片薄,內(nèi)見殘存皮膚附件結(jié)構(gòu),皮下被平行于表面的瘢痕組織充填。實驗組 4、8 周創(chuàng)面愈合率低于對照組(P lt; 0.05);創(chuàng)面收縮率有較對照組低的趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。? 結(jié)論 大鼠自體刃厚皮與 PADM 支架復(fù)合移植修復(fù)全層皮膚缺損,復(fù)合皮片厚,彈性好, PADM 在體內(nèi)逐步被自體膠原所替代。
目的 評價微量過氧乙酸的細胞毒性,為過氧乙酸滅菌時殘余量限值的制定提供實驗依據(jù)。 方 法 采用體外細胞培養(yǎng)技術(shù),觀察體積分數(shù)(V/V)為1 × 10-6、2 × 10-6、3 × 10-6、4 × 10-6、5 × 10-6 和10 × 10-6 的過氧乙酸對第3 代L929 小鼠成纖維細胞生長的影響,將不含過氧乙酸的培養(yǎng)基作為對照組。分別于培養(yǎng)后2、4 和7 d 經(jīng)MTT 比色法測定各組吸光度(A)值,繪制細胞生長曲線,計算各組細胞相對增殖率,對不同濃度過氧乙酸進行細胞毒性評價。 結(jié)果 培養(yǎng)后2、4 和7 d,1 × 10-6 組與對照組細胞形態(tài)及生長狀況相似,其余各組細胞生長較差。MTT 法檢測顯示,各時間點對照組A 值最大,除1 × 10-6 組與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)外,其余各濃度組與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。相關(guān)分析顯示,各時間點隨著過氧乙酸濃度增加A 值逐漸下降,細胞增殖與過氧乙酸濃度成負相關(guān);培養(yǎng)后2、4 和7 d,相關(guān)系數(shù)分別為— 1.000、— 1.000、— 0.964(P lt; 0.001),相關(guān)程度隨時間延長逐漸減小。1 × 10-6 組與對照組生長曲線近似,具有明顯的指數(shù)增長期,其余組生長曲線較平緩。1 × 10-6 組過氧乙酸的細胞毒性分級為1 級,2 × 10-6 組為2 級,3 × 10-6 組為3 級,4 × 10-6 組為3 ~ 4 級,5 × 10-6、10 × 10-6 組均為4 級。 結(jié)論 1 × 10-6 過氧乙酸無明顯細胞毒性,濃度超過1 × 10-6 的過氧乙酸具有不同程度細胞毒性。