【摘 要】 目的 評價(jià)HA 復(fù)合rhBMP-2 的腺病毒(adenovirus mediated rhBMP-2,Adv-rhBMP-2)轉(zhuǎn)染的羊BMSCs 對骨痂延長骨愈合的影響。 方法 成年山羊19 只,雌雄不限,體重15 ~ 20 kg。于每只羊髂嵴上穿刺抽取骨髓10 mL,常規(guī)傳代培養(yǎng)BMSCs。取第3 代BMSCs,以感染復(fù)數(shù)200 轉(zhuǎn)染腺病毒。取0.25% 胰蛋白酶消化轉(zhuǎn)染后3 d 的細(xì)胞1 ×108 個(gè),與HA 充分混勻制備Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA。建立山羊右側(cè)脛骨延長模型,術(shù)后立即于截骨部位注射自體細(xì)胞復(fù)合物。按術(shù)后注入物質(zhì)不同隨機(jī)分成4 組:A 組為Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA 組(n=6),B 組為Adv-rhBMP-2/BMSCs 組(n=5),C 組為Adv-β-gal/BMSCs/HA 組(n=4),D 組為空白組(n=4)。術(shù)后第7 天開始行脛骨延長,速度1 mm/d,共延長4 周。術(shù)后5、8、12 周攝X 線片觀察骨痂生長情況,12 周處死動(dòng)物,取標(biāo)本分別行骨密度檢測、生物力學(xué)測定、組織學(xué)觀察和骨形態(tài)計(jì)量學(xué)分析。 結(jié)果 X 線片檢查示,術(shù)后5、8 周A、B 組骨痂生成量明顯多于C、D 組,X 線片定量評分A、B 組明顯高于C、D 組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);12 周各組均在骨延長部位形成連續(xù)骨痂。骨密度測定:術(shù)后12 周A、B、C、D 組延長部位骨礦物質(zhì)含量分別為(4.175 ± 1.921)、(2.600 ± 0.638)、(2.425 ± 0.826)和(1.175 ± 0.574) g,骨礦物質(zhì)密度分別為(0.612 ± 0.196)、(0.630 ± 0.159)、(0.450 ± 0.166)和(0.266 ± 0.113)g/cm2,A、B 組顯著高于C、D組(P lt; 0.05)。生物力學(xué)測定:A、B、C、D 組最大載荷分別為(490.20 ± 155.08)、(350.59 ± 80.48)、(221.95 ± 68.79)和(150.65 ± 92.29)N,彈性模量為(178.24 ± 105.80)、(105.88 ± 27.09)、(81.18 ± 48.67)和(50.35 ± 47.64)MPa,各指標(biāo)A組顯著高于C、D 組(P lt; 0.05)。組織學(xué)觀察見A 組骨延長處大量新生骨組織,骨小梁多為縱行網(wǎng)狀排列。骨形態(tài)計(jì)量分析示A、B、C、D 組新骨體積分別為72.35% ± 5.68%、67.58% ± 7.42%、49.63% ± 4.87% 和38.87% ± 2.35%,A 組新生骨生成量明顯比D 組多(P lt; 0.05)。 結(jié)論 HA 復(fù)合rhBMP-2 修飾的BMSCs 制備的組織工程骨可促進(jìn)羊脛骨延長骨愈合。