探討自體PRP 對(duì)體外培養(yǎng)人脂肪來源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)增殖及成骨分化的影響。 方法 取自愿捐獻(xiàn)吸脂術(shù)獲取的脂肪組織進(jìn)行分離培養(yǎng)ADSCs,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。將第3 代ADSCs 分別行成脂、成軟骨定向誘導(dǎo)培養(yǎng)鑒定,并行CD29 及CD44 免疫熒光染色觀察。取第3 代ADSCs 分別采用含10 mL/L PRP 的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基(PRP 組)和不含PRP 的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基(對(duì)照組)進(jìn)行培養(yǎng),倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,培養(yǎng)后1、2、3、4、5 d 采用MTT 法檢測細(xì)胞增殖活性;7、14、21、28 d 行ALP 活性檢測,另取培養(yǎng)7、14 d 的PRP組細(xì)胞行ALP 染色觀察;14 d 時(shí)行PRP 組茜素紅染色檢測鈣結(jié)節(jié)形成情況。 結(jié)果 倒置顯微鏡下第3 代ADSCs 多為梭形,倍增時(shí)間約35 h。成脂及成軟骨誘導(dǎo)鑒定均為陽性,免疫熒光染色CD29 和CD44 呈陽性。MTT 法示PRP 組1、2、3、4、5 d 的吸光度值分別為0.137 ± 0.015、0.219 ± 0.023、0.367 ± 0.031、0.586 ± 0.039、0.948 ± 0.046,對(duì)照組分別為0.081 ±0.009、0.115 ± 0.012、0.162 ± 0.017、0.242 ± 0.025、0.356 ± 0.032,兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01)。成骨誘導(dǎo)7 d后,PRP 組ALP 染色陽性,細(xì)胞胞漿呈灰黑色,可見黑色沉淀;14 d 后陽性細(xì)胞增多。ALP 活性檢測示PRP 組7、14、21、28 d 細(xì)胞活性值分別為23.96 ± 2.05、41.26 ± 3.38、38.12 ± 3.03、35.89 ± 2.24,對(duì)照組分別為17.83 ± 1.62、26.64 ± 2.37、23.85 ± 1.99、20.78 ± 1.81,兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01)。成骨誘導(dǎo)14 d 后,茜素紅染色示PRP 組鈣結(jié)節(jié)形成。 結(jié)論 體外培養(yǎng)時(shí),自體PRP 可促進(jìn)人ADSCs 的增殖并誘導(dǎo)成骨分化,為骨組織工程提供一種新的種子細(xì)胞來源。
目的 總結(jié)應(yīng)用雙蒂下唇動(dòng)脈島狀唇紅瓣修復(fù)上唇過薄畸形的手術(shù)經(jīng)驗(yàn)。 方法 1997年3月~2005年3月治療上唇過薄畸形7例,男2例,女5例。年齡16~23歲。其中先天性雙側(cè)唇裂術(shù)后繼發(fā)畸形5例,唇部血管瘤同位素治療后繼發(fā)唇萎縮2例。島狀唇瓣長度相當(dāng)于整個(gè)下唇,最寬處為0.5~0.8 cm。于下唇制作以雙側(cè)下唇動(dòng)脈為營養(yǎng)血管蒂的島狀唇紅瓣,移位修復(fù)上唇唇紅組織缺損。其中5例于術(shù)后3~6個(gè)月后再次行唇弓、唇珠、人中等成形或改形術(shù)。 結(jié)果 術(shù)后唇瓣全部成活,傷口Ⅰ期愈合,7 d拆線。隨訪1~3年,上唇唇紅豐滿,唇瓣色澤良好,美容標(biāo)志明顯;下唇瘢痕不明顯,功能不受影響。上下唇協(xié)調(diào)、美觀。 結(jié)論 雙蒂下唇動(dòng)脈島狀皮瓣修復(fù)上唇唇紅組織缺損,設(shè)計(jì)合理,實(shí)用性強(qiáng),效果可靠,值得推廣應(yīng)用。
目的 探討透明質(zhì)酸(HA)延遲創(chuàng)面愈合的作用。方法 成年日本大耳白兔8只,建立兔耳創(chuàng)傷愈合模型,隨機(jī)分成2%HA治療組(A組),1%HA治療組(B組),磷酸鹽緩沖液(PBS)對(duì)照組(C組,進(jìn)行大體形態(tài)、組織學(xué)變化、平均愈合時(shí)間、創(chuàng)面收縮情況、殘余創(chuàng)面面積、成纖維細(xì)胞α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)及超微結(jié)構(gòu),觀察12天。結(jié)果 ①三組創(chuàng)面平均愈合時(shí)間為(11.7±0.6)、(11.3±0.6)和(10.8±1.0)天,三組之間有顯著差異(Plt;0.05);A、B組與C組比較創(chuàng)面收縮速率及殘余面積也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。②組織學(xué)見A、B兩組膠原纖維較細(xì),排列整齊;C組膠原纖維較粗大,排列紊亂。③ A、B組α平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)少于C組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.01)。結(jié)論 HA通過抑制成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而抑制創(chuàng)面收縮,是延遲創(chuàng)面愈合的原因之一;且這一作用與其濃度有依賴關(guān)系。
目的 探討肘部動(dòng)脈吻合網(wǎng)對(duì)于上肢軸型皮瓣擴(kuò)大切取的意義。方法 選取27側(cè)新鮮成人尸體上肢制成ABS鑄型標(biāo)本,逐層腐蝕、即時(shí)觀察肘后、肘外側(cè)區(qū)動(dòng)脈吻合網(wǎng)的血供來源、分布,觀測吻合血管的數(shù)量和總截面積,并與肘前區(qū)及肘內(nèi)側(cè)區(qū)進(jìn)行比較。結(jié)果 肘后區(qū)的吻合支數(shù)量達(dá)(8.64±2.74)支,截面積(0.48±0.11)mm2。肘外側(cè)區(qū)吻合支為(8.30±1.19)支,截面積(0.37±0.03)mm2。具有豐富的動(dòng)脈吻合網(wǎng)。結(jié)論 肘后、肘外側(cè)區(qū)具備橋接臂部與前臂之間的跨區(qū)互蒂軸型皮瓣的能力。
目的 為了減少頸淺動(dòng)脈皮瓣移位修復(fù)頸部創(chuàng)面后的并發(fā)癥,設(shè)計(jì)了預(yù)擴(kuò)張皮瓣的方法,觀察其臨床效果。方法 1995年3月~1997年10月,對(duì)12例頸部瘢痕攣縮畸形患者,先行頸淺動(dòng)脈皮瓣供區(qū)預(yù)擴(kuò)張術(shù),二期行預(yù)擴(kuò)張皮瓣移位修復(fù)頸部瘢痕切除后創(chuàng)面,其中頜頸粘連9例,下唇頜頸粘連3例。預(yù)擴(kuò)張皮瓣最大為35cm×14cm,最?。保叮悖怼粒罚悖?。結(jié)果 術(shù)后1例皮瓣遠(yuǎn)端3cm×2cm壞死,植皮后創(chuàng)面愈合。其余11例皮瓣完全成活。隨訪6個(gè)月~3年,所有患者頸部活動(dòng)明顯改善,頜頸角生理角度恢復(fù),皮瓣色澤正常,外觀不臃腫,未見繼發(fā)攣縮。結(jié)論 頸淺動(dòng)脈皮瓣預(yù)擴(kuò)張后移位修復(fù)頸部瘢痕攣縮畸形是較理想的一種方法。
目的 綜述中面部脂肪室相關(guān)研究進(jìn)展,全面了解中面部脂肪室解剖及其老化的形態(tài)表現(xiàn)、相關(guān)臨床應(yīng)用現(xiàn)狀。 方法 廣泛查閱近年來中面部脂肪室研究及臨床應(yīng)用的相關(guān)文獻(xiàn),并進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果 中面部脂肪層曾被認(rèn)為是融合而連續(xù)的層次,在老化的過程中表現(xiàn)為脂肪整體萎縮。隨著解剖研究的深入,新近研究表明中面部脂肪層被筋膜、韌帶或肌肉分隔為多個(gè)脂肪室,并分成深、淺兩層,在老化過程中表現(xiàn)為淺層肥大而深層萎縮。臨床應(yīng)用表明,對(duì)深內(nèi)側(cè)面頰脂肪室及 Ristow’s space 進(jìn)行脂肪容量填充,可有效恢復(fù)中面部年輕化外觀。 結(jié)論 中面部脂肪室的研究取得了顯著進(jìn)展,為脂肪容量填充的臨床應(yīng)用提供了新的理論依據(jù)。根據(jù)不同部位、不同層面的脂肪室發(fā)生的不同老化改變進(jìn)行相應(yīng)處理,可實(shí)現(xiàn)中面部年輕化。
目的 總結(jié)聯(lián)合應(yīng)用封閉式負(fù)壓引流與人工真皮治療下肢慢性潰瘍的臨床效果。 方法 2011年1 月-2012年6月,收治19例下肢慢性潰瘍患者。其中男10例,女9例;年齡12~68歲,平均46歲。病因:創(chuàng)傷性潰瘍7例,靜脈淤血性潰瘍3例,動(dòng)脈供血不足性潰瘍1例,神經(jīng)營養(yǎng)不良性潰瘍2例,糖尿病性潰瘍6例。病程2個(gè)月~3年。創(chuàng)面范圍3 cm × 2 cm~12 cm × 9 cm。6例伴骨、肌腱外露。擴(kuò)創(chuàng)后先行封閉式負(fù)壓引流培養(yǎng)新鮮肉芽組織,然后移植人工真皮,待類真皮組織形成后移植自體刃厚皮片封閉創(chuàng)面。 結(jié)果患者住院時(shí)間33~50 d,平均42 d。潰瘍均順利愈合,無嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生。患者均獲隨訪,隨訪時(shí)間6~24個(gè)月。創(chuàng)面皮片色澤良好,質(zhì)地柔軟,耐磨,無明顯攣縮或繼發(fā)功能障礙;潰瘍無復(fù)發(fā)。 結(jié)論聯(lián)合應(yīng)用封閉式負(fù)壓引流與人工真皮移植治療下肢慢性潰瘍簡便易行、安全有效。
目的 探討曲尼司特對(duì)小鼠燒傷創(chuàng)面愈合時(shí)間的影響及其抑制瘢痕增生的作用機(jī)制,以及曲尼司特抑制瘢痕增生的能力是否隨給藥時(shí)間點(diǎn)變化而變化。 方法 7~8 周齡清潔級(jí)雄性昆明小鼠 66 只,于小鼠背部制備深Ⅱ度燒傷模型,然后隨機(jī)分為對(duì)照組(n=18)、早期干預(yù)組(n=18)、中期干預(yù)組(n=18)和晚期干預(yù)組(n=12)。早、中、晚期干預(yù)組分別于造模后當(dāng)天、7 d、14 d 開始給予曲尼司特 200 mg/(kg·d)灌胃,對(duì)照組于造模后當(dāng)天開始每天給予等體積生理鹽水灌胃。定期觀察創(chuàng)面愈合情況,對(duì)照組及早、中期干預(yù)組分別于造模后 14、28、42 d,晚期干預(yù)組于 28、42 d,隨機(jī)選取 6 只小鼠取創(chuàng)面新生組織,分別行甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞形態(tài),Masson 染色觀察總膠原含量情況;行免疫組織化學(xué)染色觀測Ⅰ型膠原及Ⅲ型膠原含量,并計(jì)算Ⅰ/Ⅲ型膠原含量比值;ELISA 法檢測組織中 TGF-β1 和組胺含量;透射電鏡觀察成纖維細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 各組小鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.105,P=0.371)。早期干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)肥大細(xì)胞數(shù)、總膠原含量、Ⅰ/Ⅲ型膠原含量比值、TGF-β1 含量及組胺含量均顯著低于其他組(P<0.05);除 42 d 時(shí)對(duì)照組肥大細(xì)胞數(shù)、總膠原含量、組胺含量與晚期干預(yù)組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)外,其余各時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組及中、晚期干預(yù)組間以上指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與對(duì)照組相比,早期干預(yù)組成纖維細(xì)胞活躍程度明顯被抑制,纖維排列更加規(guī)律整齊;中、晚期干預(yù)組成纖維細(xì)胞活性亦較明顯被抑制。 結(jié)論 曲尼司特干預(yù)對(duì)小鼠燒傷創(chuàng)面愈合時(shí)間無明顯影響,但能明顯降低新生組織中肥大細(xì)胞、組胺和 TGF-β1 含量,抑制成纖維細(xì)胞膠原合成能力及調(diào)節(jié)膠原合成的比值,從而抑制瘢痕增生,且燒傷后即刻進(jìn)行曲尼司特干預(yù)對(duì)瘢痕增生的抑制作用最明顯。