目的 觀察不同濃度的三氧化二砷(As2O3)作用不同時(shí)間后對(duì)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7的影響及其作用機(jī)理。方法 應(yīng)用不同濃度的As2O3作用于乳腺癌細(xì)胞后,觀察As2O3對(duì)乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響; 用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法觀察其對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的影響; 應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)As2O3對(duì)MCF-7細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。結(jié)果 不同濃度的As2O3作用于乳腺癌細(xì)胞有明顯的時(shí)間和劑量依賴性,As2O3作用后細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受抑制,并出現(xiàn)明顯的凋亡特征性改變(細(xì)胞膜完整、染色質(zhì)固縮、核碎裂、凋亡小體形成); 經(jīng)1、2、4及8 μmol/L 4個(gè)劑量的As2O3處理48 h后,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)到細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)DNA降解形成梯形分子條帶; 4 μmol/L As2O3作用24、48及72 h后TUNEL法可檢測(cè)到細(xì)胞凋亡水平顯著性升高。結(jié)論 As2O3可明顯抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng),其機(jī)理主要是誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡。
目的 探討青蒿素(artemisinin)對(duì)急性胰腺炎胰腺腺泡細(xì)胞凋亡的影響,并了解是否減輕急性胰腺炎嚴(yán)重程度。方法 腹腔內(nèi)注射雨蛙素(cerulein)誘導(dǎo)大鼠胰腺炎模型建立,設(shè)正常對(duì)照組、胰腺炎組及青蒿素組,通過原位末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測(cè)各組胰腺組織中腺泡細(xì)胞的凋亡指數(shù),并用分光光度法檢測(cè)髓過氧化物酶(MPO)活性。采用兩步酶消化法分離正常大鼠胰腺腺泡細(xì)胞,離體分組培養(yǎng),采用丫碇橙(AO)染色及caspase3活性的檢測(cè),評(píng)估青蒿素對(duì)胰腺腺泡細(xì)胞凋亡的影響,并檢測(cè)各組培養(yǎng)液中的乳酸脫氫酶(LDH)及淀粉酶(AMS)活性,評(píng)估胰腺腺泡細(xì)胞酶的釋放。結(jié)果 在體實(shí)驗(yàn)中,青蒿素組與胰腺炎組比較,胰腺腺泡細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯增高(P<0.05),MPO活性明顯減低(P<0.05)。體外實(shí)驗(yàn)中,青蒿素組胰腺腺泡細(xì)胞凋亡指數(shù)及caspase3活性較胰腺炎組明顯增高(P<0.05),培養(yǎng)液中的LDH和AMS活性也明顯降低(P<0.05)。結(jié)論 青蒿素可促進(jìn)大鼠急性胰腺炎胰腺腺泡細(xì)胞凋亡,減少胰酶釋放及中性粒細(xì)胞激活,可減輕急性胰腺炎嚴(yán)重程度。