目的檢測(cè)黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在直腸癌中的表達(dá),探索其與直腸癌臨床病理的關(guān)系及其在直腸癌免疫治療中的應(yīng)用價(jià)值。方法采用RT-PCR法,對(duì)33例直腸癌患者的癌組織及其相應(yīng)距腫瘤邊緣(5±1) cm的癌旁組織和手術(shù)切緣(乙狀結(jié)腸端)以及3例直腸息肉標(biāo)本(無(wú)瘤)的MAGE-3的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中的目的基因片段進(jìn)行DNA測(cè)序驗(yàn)證。結(jié)果33例直腸癌組織中,MAGE-3基因的表達(dá)陽(yáng)性率為42.42%(14/33),在癌旁組織和手術(shù)切緣組織中,MAGE-3基因的表達(dá)陽(yáng)性率分別為18.18%(6/33)和15.15%(5/33),3例直腸息肉標(biāo)本未見MAGE-3表達(dá)。腫瘤組織MAGE-3基因表達(dá)陽(yáng)性率均顯著高于癌旁組織和手術(shù)切緣組織(P<0.05); 而與患者年齡、性別、腫瘤組織學(xué)類型、Dukes分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(Pgt;0.05)。結(jié)論基于MAGE-3基因在直腸癌中的高表達(dá)率,MAGE-3表達(dá)的蛋白可以作為一種有前途的靶點(diǎn)用于免疫治療,同時(shí)有望成為一種篩查和隨訪指標(biāo)。
目的 觀察在小鼠內(nèi)源性損傷模型下肝臟Kupffer細(xì)胞(Kupffer cell,KC)和肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(sinusoidal endothelial cells,SEC)表面Toll樣受體2(TLR2)蛋白及mRNA表達(dá)。方法 在肝部分缺血-再灌注損傷模型下,采用原位灌注消化法分離并純化KC和SEC,用大鼠抗小鼠TLR2 IgG和異硫氰酸熒光素(FITC)的二抗進(jìn)行染色,流式細(xì)胞儀(FCM)測(cè)定陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),并用實(shí)時(shí)定量PCR(RealTime RT-PCR)檢測(cè)兩種細(xì)胞中TLR2 mRNA含量。 結(jié)果 損傷組KC TLR2的表達(dá)明顯高于假手術(shù)組,蛋白質(zhì)表達(dá)為(9.19±1.07)% vs (1.52±0.21)%, P<0.01; mRNA表達(dá)為0.54±0.77 vs 2.62±2.19, P<0.05。SEC差異并無(wú)顯著性意義。結(jié)論 在肝缺血-再灌注損傷中,小鼠肝KC TLR2在蛋白質(zhì)和mRNA水平的表達(dá)明顯增高。