目的探討體外篩選及鑒定人角朊干細胞(KSC)的方法. 方法利用KSC對細胞外基質(zhì)的快速黏附性,選擇不同時間黏附的細胞分為5、20和60分鐘3組,并以不進行篩選的細胞作對照組.體外培養(yǎng)擴增后,以KSC的相對特異性標識分子β1整合素、角蛋白19(Ck19)的單克隆抗體,免疫組織化學方法對各組細胞進行鑒定,利用圖像分析系統(tǒng)測平均灰度值.并用流式細胞儀、透射電鏡對各組細胞進行檢測. 結(jié)果各組細胞在10～14天均有克隆形成,組間比較5分鐘組細胞生長較慢,但形成克隆較大,細胞體積較小.免疫組織化學β1整合素、Ck19在各組都有表達,各組平均灰度值統(tǒng)計學分析顯示,β1整合素在5分鐘組的表達與另3組間有統(tǒng)計學意義(Plt;0.05),Ck19的表達在5分鐘組與20分鐘組間無差異(Pgt;0.05),60分鐘組與對照組間差異不顯著,而前兩組與后兩組之間比較有統(tǒng)計學意義(Plt;0.05).流式細胞儀檢測提示5分鐘組細胞大部分處于G1期,與其它3組有區(qū)別.透射電鏡顯示5分鐘組細胞體小,核漿比大,細胞器不成熟. 結(jié)論利用細胞外基質(zhì)篩選的5分鐘組細胞處于幼稚狀態(tài),并有強克隆形成能力,符合預(yù)期的KSC特點,可利用KSC對細胞外基質(zhì)的快速黏附性對其純化篩選,同時利用β1整合素、Ck19的單抗加以鑒定.