目的 探討D-半乳糖(D-galactose, D-gal) 誘導(dǎo)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)衰老后的形態(tài)學(xué)及生物學(xué)變化情況。方法 取3只2月齡SD大鼠MSCs分離培養(yǎng)至第3代，一部分置于含8 g/L D-gal的培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)至第6代作為誘導(dǎo)組；另一部分在原培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)至第6代作為對照組，并作表型鑒定。采用流式細(xì)胞儀檢測對照組加入8 g/L Dgal后4 d內(nèi)細(xì)胞周期的分布變化。兩組MSCs培養(yǎng)7 d并繪制生長曲線，在光鏡和透射電鏡下觀察其形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化，β-半乳糖苷酶染色、單細(xì)胞凝膠電泳檢測DNA損傷方法檢測其衰老后的生物學(xué)行為變化。結(jié)果 誘導(dǎo)組MSCs鏡下呈典型的衰老細(xì)胞形態(tài)；對照組MSCs形態(tài)均勻，長勢良好。流式細(xì)胞儀檢測表明加入D-gal誘導(dǎo)后90% MSCs停留在G 0/G 1期，而S期和G 2/M期MSCs趨于消失，并隨誘導(dǎo)時(shí)間延長趨勢越明顯；對照組MSCs各期比例正常。MSCs生長曲線示誘導(dǎo)組生長速度較對照組明顯減慢。誘導(dǎo)組約85%呈β-半乳糖苷酶陽性染色，對照組染色為陰性。單細(xì)胞凝膠電泳示誘導(dǎo)組MSCs DNA有拖尾現(xiàn)象，對照組MSCs無DNA損傷。結(jié)論 D-gal對SD大鼠MSCs的老化具有誘導(dǎo)作用，初步推斷8 g/L為最適濃度，為研究MSCs衰老提供了較好的模型。