目的 研究納美芬缺血后處理減輕肺缺血–再灌注損傷的作用機制，探討全病程中的最佳藥物治療時機。方法 將60只大鼠隨機均分為假手術組、模型組，以及納美芬A、B、C、D組共6組，每組10只。假手術組大鼠不行缺血再灌注處理，未予藥物治療。模型組采用阻斷左肺門法建立肺缺血–再灌注模型，未予藥物治療。缺血處理后納美芬A、B、C、D組分別于肺循環(huán)再灌注前5 min、再灌注后10、30、60 min時予尾靜脈注射納美芬（15 μg/kg）。全部大鼠于再灌注3 h末處死后留取左肺上葉組織，評估各組大鼠肺組織損傷程度，檢測肺組織濕/干重比值、髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、Toll樣受體2（Toll-like receptor 2，TLR2）mRNA、MyD88 mRNA以及TLR2、MyD88、核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）p65、p-NF-κB p65表達水平。結果 模型組和納美芬A、B、C、D組均可見不同程度的肺泡間隔破壞，肺間質水腫明顯、間質內炎癥細胞浸潤和紅細胞滲出，部分肺泡萎陷。在濕/干重比值、肺組織損傷評分、MPO活性和TNF-α、TLR2 mRNA和MyD88 mRNA以及TLR2、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α表達水平等方面，模型組各檢測值均顯著高于假手術組（均P<0.01）；納美芬D組各檢測值與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），納美芬缺血后處理各組相應檢測值呈現(xiàn)納美芬D組>納美芬C組>納美芬B組>納美芬A組的特點，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。結論 納美芬減輕肺缺血–再灌注損傷與抑制TLR2、MyD88、NF-κB p65表達和NF-κB p65磷酸化，減輕炎癥反應密切相關，此作用可能存在給藥時間–效應性特點。
目的 探討利用Toll樣受體關鍵蛋白轉錄水平抑制劑髓細胞樣分化標記物(myeloid differentiation marker 88，MyD88) siRNA，制備半成熟樹突狀細胞（dendritic cell，DC）的表型和致耐受功能。 方法 取BALB/c小鼠骨髓接種、培養(yǎng)，加入濃度為10ng/ml 的重組小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子（rmGM-CSF）誘導，培養(yǎng)至第8d將DC分為3組，空白對照組：于培養(yǎng)過程中不加其它任何物質；LPS組：加入終濃度為1μg/ml 的LPS；實驗組：加入MyD88 siRNA 4h后，再加入1μg/ml 的LPS。采用流式細胞術檢測3組DC 的表型，用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測培養(yǎng)上清的白細胞介素10（IL-10）、白細胞介素12（IL-12）的含量，初次和再次混合淋巴細胞實驗檢測DC刺激T細胞增殖能力，并觀察術后鼠移植心存活時間。 結果 空白對照組DC表型為CD11c＋、CD25－、CD40 low、CD80low、CD86low和MHC-Ⅱlow未成熟表型DC,再經LPS刺激后成為成熟表型DC；而實驗組DC表型為CD11c＋、CD25－、CD40mid、CD80low、CD86low和MHC-Ⅱmid半成熟表型，其IL-10/IL-12比率明顯增高；可誘導同種異型T細胞無反應性,并能延長移植心存活時間。 結論 MyD88siRNA轉染結合LPS刺激可使未成熟DC進一步分化為一種半成熟DC，較未成熟DC擁有更穩(wěn)定有效的致耐受特性。